Ribonuklease A: Forskelle mellem versioner

Fra Wikipedia, den frie encyklopædi
Content deleted Content added
Tags: Mobilredigering Mobilwebredigering
Linje 3: Linje 3:
'''Ribonuklease A''' (kort '''RNase A''' eller '''RNAase A''') er en [[endonuklease]], der kløver enkeltstrenget [[RNA]]. RNase A fra [[oksedyr]]s [[bugspytkirtlen|bugspytkirtler]] er et af de klassiske [[modelorganisme|modelsystemer]] inden for [[proteinteknologi|proteinvidenskaben]].
'''Ribonuklease A''' (kort '''RNase A''' eller '''RNAase A''') er en [[endonuklease]], der kløver enkeltstrenget [[RNA]]. RNase A fra [[oksedyr]]s [[bugspytkirtlen|bugspytkirtler]] er et af de klassiske [[modelorganisme|modelsystemer]] inden for [[proteinteknologi|proteinvidenskaben]].


<span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">== Historie == Vigtigheden af RNase A fra oksedyrs bugspytkirtler blev sikret, da firmaet [[Armour and Company]] oprensede et kilogram af det og gav prøver af 10 mg gratis væk til en hvilken som helst interesseret videnskabsmand.</span> == Sejarah == Pentingnya RNase A dari pankreas sapi dipastikan saat perusahaan [[Armor and Company]] membersihkan satu kilogramnya dan memberikan sampel 10 mg secara gratis kepada ilmuwan yang berminat.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">Muligheden for at få en masse af et enkelt rent protein hurtigt gjorde RNase A til et egnet modelprotein.</span> Kemampuan untuk mendapatkan banyak protein murni tunggal dengan cepat membuat RNase A menjadi model protein yang sesuai.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">RNase A var det første modelprotein, der blev brugt til at finde mange [[spektroskopi]]ske metoder til proteinstruktur vha. [[enzymassay|assays]], inklusiv absorbans, [[cirkulær dikroisme]], [[Raman-spektroskopi]], [[Elektronspinresonans|EPR]] og [[NMR-spektroskopi]].</span> RNase A adalah model protein pertama yang digunakan untuk menemukan banyak metode [[spektroskopi] struktur protein dengan menggunakan [[enzyme assays | assays]], termasuk absorbansi, [[circular dichroism]], [[spektroskopi Raman]] , [[Elektron spin resonansi | EPR]] dan [[NMR spektroskopi]].</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">RNase A var også det første modelprotein til udvikling af flere kemisk strukturelle metoder, såsom afgrænset proteolyse af uordnede segmenter, kemisk modifikation af udsatte [[sidekæde]]r og antigengenkendelse.</span> RNase A juga merupakan model protein pertama untuk pengembangan beberapa metode struktur kimia, seperti proteolitik terpisah dipisahkan, modifikasi kimia dari r [rujukan] rantai r] dan pengenalan antigen.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">Ribonuklease S, hvilket er RNase A, der er blevet behandlet med [[subtilisin]], var det tredje protein, hvis struktur blev løst (1967).<ref>Wyckoff HW, Hardman KD, Allewell NM, Inagami T, Johnson LN, [[Frederic M. Richards|Richards FM.]] ''The structure of ribonuclease-S at 3.5 A resolution.'' J Biol Chem.</span> Ribonuclease S, yang merupakan RNase A, yang telah diobati dengan [[subtilisin]], adalah protein ketiga yang strukturnya terselesaikan (1967). <Ref> Wyckoff HW, Hardman KD, Allewell NM, Inagami T, Johnson LN, [[Frederic M. Richards | Richards FM.]] Struktur ribonuclease-S pada resolusi 3,5 A. J Biol Chem.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">1967 Sep 10;242(17):3984-8.</span> 1967 Sep 10; 242 (17): 3984-8.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">{{PMID|6037556}}</ref> Studier af [[oxidativ foldning]] af RNase A førte [[Christian B. Anfinsen]] til at formulere den termodynamiske hypotese for proteinfoldning, hvilken gør rede for, at et proteins foldede form repræsenterer minimummet af dets frie energi.</span> Penelitian tentang [[lipatan oksidatif]] RNase A memimpin [[Christian B. Anfinsen]] untuk merumuskan hipotesis termodinamika untuk lipatan protein, yang menjelaskan bahwa bentuk protein terlipat mewakili minimum energi bebasnya.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">RNase A var det første protein, hvormed effekten af ikke-native [[isomer]]er af X-Pro-[[peptidbinding]]er i proteinfoldning blev vist.</span> RNase A adalah protein pertama dengan efek non-asli [[isomer]] X-Pro - [[peptide binding]] dalam lipatan protein ditunjukkan.</span> <span class="notranslate" onmouseover="_tipon(this)" onmouseout="_tipoff()"><span class="google-src-text" style="direction: ltr; text-align: left">RNase A var ligeledes det første protein, der blev studeret ved [[mangefold sekvensopretning]] (MSA) og ved at sammenligne egenskaberne af evolutionært beslægtede proteiner.</span> RNase A juga merupakan protein pertama yang dipelajari oleh [MSF] dan dengan membandingkan karakteristik protein terkait evolusioner.</span>
== Historie ==
Vigtigheden af RNase A fra oksedyrs bugspytkirtler blev sikret, da firmaet [[Armour and Company]] oprensede et kilogram af det og gav prøver af 10 mg gratis væk til en hvilken som helst interesseret videnskabsmand. Muligheden for at få en masse af et enkelt rent protein hurtigt gjorde RNase A til et egnet modelprotein.

RNase A var det første modelprotein, der blev brugt til at finde mange [[spektroskopi]]ske metoder til proteinstruktur vha. [[enzymassay|assays]], inklusiv absorbans, [[cirkulær dikroisme]], [[Raman-spektroskopi]], [[Elektronspinresonans|EPR]] og [[NMR-spektroskopi]]. RNase A var også det første modelprotein til udvikling af flere kemisk strukturelle metoder, såsom afgrænset proteolyse af uordnede segmenter, kemisk modifikation af udsatte [[sidekæde]]r og antigengenkendelse.

Ribonuklease S, hvilket er RNase A, der er blevet behandlet med [[subtilisin]], var det tredje protein, hvis struktur blev løst (1967).<ref>Wyckoff HW, Hardman KD, Allewell NM, Inagami T, Johnson LN, [[Frederic M. Richards|Richards FM.]] ''The structure of ribonuclease-S at 3.5 A resolution.'' J Biol Chem. 1967 Sep 10;242(17):3984-8. {{PMID|6037556}}</ref>

Studier af [[oxidativ foldning]] af RNase A førte [[Christian B. Anfinsen]] til at formulere den termodynamiske hypotese for proteinfoldning, hvilken gør rede for, at et proteins foldede form repræsenterer minimummet af dets frie energi. RNase A var det første protein, hvormed effekten af ikke-native [[isomer]]er af X-Pro-[[peptidbinding]]er i proteinfoldning blev vist. RNase A var ligeledes det første protein, der blev studeret ved [[mangefold sekvensopretning]] (MSA) og ved at sammenligne egenskaberne af evolutionært beslægtede proteiner.


== Struktur og egenskaber ==
== Struktur og egenskaber ==

Versionen fra 13. feb. 2018, 05:59

Strukturen for RNase A vist som et bånddiagram

Ribonuklease A (kort RNase A eller RNAase A) er en endonuklease, der kløver enkeltstrenget RNA. RNase A fra oksedyrs bugspytkirtler er et af de klassiske modelsystemer inden for proteinvidenskaben.

== Historie == Vigtigheden af RNase A fra oksedyrs bugspytkirtler blev sikret, da firmaet Armour and Company oprensede et kilogram af det og gav prøver af 10 mg gratis væk til en hvilken som helst interesseret videnskabsmand. == Sejarah == Pentingnya RNase A dari pankreas sapi dipastikan saat perusahaan Armor and Company membersihkan satu kilogramnya dan memberikan sampel 10 mg secara gratis kepada ilmuwan yang berminat. Muligheden for at få en masse af et enkelt rent protein hurtigt gjorde RNase A til et egnet modelprotein. Kemampuan untuk mendapatkan banyak protein murni tunggal dengan cepat membuat RNase A menjadi model protein yang sesuai. RNase A var det første modelprotein, der blev brugt til at finde mange spektroskopiske metoder til proteinstruktur vha. assays, inklusiv absorbans, cirkulær dikroisme, Raman-spektroskopi, EPR og NMR-spektroskopi. RNase A adalah model protein pertama yang digunakan untuk menemukan banyak metode [[spektroskopi] struktur protein dengan menggunakan  assays, termasuk absorbansi, circular dichroism, spektroskopi Raman ,  EPR dan NMR spektroskopi. RNase A var også det første modelprotein til udvikling af flere kemisk strukturelle metoder, såsom afgrænset proteolyse af uordnede segmenter, kemisk modifikation af udsatte sidekæder og antigengenkendelse. RNase A juga merupakan model protein pertama untuk pengembangan beberapa metode struktur kimia, seperti proteolitik terpisah dipisahkan, modifikasi kimia dari r [rujukan] rantai r] dan pengenalan antigen. Ribonuklease S, hvilket er RNase A, der er blevet behandlet med subtilisin, var det tredje protein, hvis struktur blev løst (1967).Fodnotefejl: Afsluttende </ref> mangler for <ref>-tag Studier af oxidativ foldning af RNase A førte Christian B. Anfinsen til at formulere den termodynamiske hypotese for proteinfoldning, hvilken gør rede for, at et proteins foldede form repræsenterer minimummet af dets frie energi. Penelitian tentang lipatan oksidatif RNase A memimpin Christian B. Anfinsen untuk merumuskan hipotesis termodinamika untuk lipatan protein, yang menjelaskan bahwa bentuk protein terlipat mewakili minimum energi bebasnya. RNase A var det første protein, hvormed effekten af ikke-native isomerer af X-Pro-peptidbindinger i proteinfoldning blev vist. RNase A adalah protein pertama dengan efek non-asli isomer X-Pro - peptide binding dalam lipatan protein ditunjukkan. RNase A var ligeledes det første protein, der blev studeret ved mangefold sekvensopretning (MSA) og ved at sammenligne egenskaberne af evolutionært beslægtede proteiner. RNase A juga merupakan protein pertama yang dipelajari oleh [MSF] dan dengan membandingkan karakteristik protein terkait evolusioner.

Struktur og egenskaber

Bånddiagram af ribonuklease A fra oksedyrs bugspytkirtler markeret med restnumre (fra PDB 7RSA). Farven går fra blå (N-terminalen) til rød (C-terminalen). De fire disulfidbundne cysteiner er vist i gul med deres svovlatomer fremhævet som små kugler. Rester, der er vigtige for katalyse, er vist i lilla.

RNase A er et relativt lille protein (124 rester, ~13,7 kDa). Det kan karakteriseres som et tolags -protein, der er foldet halvt over og ligner en taco med en dyb kløft til binding af RNA-substratet. Det første lag består af tre alfahelicer (resterne 3-13, 24-34 og 50-60) fra den N-terminale ende af proteinet. Det andet lag består af tre β-hårnåle (resterne 61-74, 79-104 og 105-124 fra den C-terminale ende) arrangeret i to β-plader. Hårnålene 61-74 og 105-124 danner en firestrenget, antiparallel β-plade, der ligger på helix 3 (resterne 50-60). Den længste β-hårnål (79-104) parrer med en kort β-streng (resterne 42-45) og danner en tre-strenget, antiparallel β-plade, der ligger på helix 2 (resterne 24-34).

RNase A har fire difulfidbindinger i dets native form: Cys26-Cys84, Cys58-110, Cys40-95 og Cys65-72. De første to (26-84 og 58-110) er essentielle for konformationel foldning; hver enkelt binder en alfahelix i det ene lag til en betaplade i det andet lag, hvormed en lille hydrofob kerne dannes. De sidste to svovlbroer (40-95 og 65-72) er mindre essentielle for foldningen; enten den ene eller den anden kan reduceres (blot ikke begge) uden at det påvirker den native struktur under fysiologiske betingelser. Disse svovlbroer forbinder loop-segmenter og er relativt eksponerede for solvent. Svovlbroen 65-72 har en ekstraordinær høj tilbøjelighed til at dannes, specielt mere end hvad ville forventes af dets loop-entropi, både som peptid og som hele proteinet. Dette tyder på, at 61-74 β-hårnålen har stor tilbøjelighed til at folde konformationelt.

Enzymatisk mekanisme

De positive ladninger på RNase A er hovedsageligt placeret i den dybe kløft mellem de to loops. RNA-substratet ligger i denne kløft og kløves af to katalytiske histidiner, His12 og His119, via et cyklisk fosfatintermediat, der stabiliseres af nærliggende lysiner så som Lys7, Lys41 og Lys66.

Referencer

  • D'Alessio G and Riordan JF, eds. (1997) Ribonucleases: Structures and Functions, Academic Press.
  • Raines RT. (1998) "Ribonuclease A", Chem. Rev., '98, 1045-1065.
  • Scheraga HA, Wedemeyer WJ and Welker E. (2001) "Bovine Pancreatic Ribonuclease A: Oxidative and Conformational Folding Studies", Methods Enzymol., 341, 189-221.

External links